蛋白折叠复性 技术服务

不溶性聚集体,也称包涵体,虽不具有生物学活性,却严重阻碍了表达蛋白在下游研究中的应用,因此包涵体的形成是进行原核蛋白表达时所遇到的主要问题之一。百细生物通过专利的蛋白折叠复性技术(高静水压技术,小分子添加剂,柱层析等),为客户提供蛋白折叠复性服务,可使蛋白包涵体溶解并恢复表达蛋白的生物学活性。

服务优势
如果您需要,可以一次同时订购原核表达服务和蛋白折叠复性服务,我们保证超过95%的包涵体均能溶解并折叠复性,提供给客户的复性后蛋白纯度为85%以上(最终纯度根据含有包涵体的目的蛋白数量而定),并储存于特定缓冲液中。

百细生物蛋白折叠复性服务的主要内容如下:

1.分析目标蛋白的理化性质
2.在1L体系中进行复性优化
3.复性策略是根据蛋白的序列及结构性质决定的。一般来说,我们的方案包括以下几点:
a.直接稀释法
b.透析以及渗滤
c.小分子物质辅助
•变性剂
•氨基酸
•聚合体:胶束和脂质体
•乙醇
•降低/氧化反应
•盐:Na/K/Mg-Cl and (NH4)2SO4
•糖类:葡萄糖,蔗糖以及海藻糖
d.人工分子伴侣体系:去污剂与非去污剂
e.色谱复性技术:SEC (体积排除色谱法), HIC (疏水相互作用色谱法), 亲和柱以及IEC (离子交换层析法)
f.分子伴侣辅助复性:ATP-dependent and ATP-independent
g.梯度法:pH, Tem, 静水压, 以及变性剂

交付信息:
1L表达体系中,我们可为客户提供纯度为85%、含有30-50%的可溶性复性蛋白(根据含有包涵体的蛋白数量而定)。复性蛋白经过Coomassie-stained gels(考马斯亮蓝染色的双向电泳凝胶法)以及western blot分析法(使用标记抗体或客户提供的特异性蛋白抗体)检测后,并放在特定的缓冲液中交付给客户。

蛋白表达 服务

杭州百细生物科技有限公司
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